La aplicación de las técnicas de inmunohistoquímica (IHQ) sobre muestras tisulares o citológicas identifica, mediante anticuerpos policlonales o monoclonales específicos, los determinantes antigénicos característicos de distintas líneas de diferenciación y funcionalismo celular. La incorporación de la IHQ en el proceso de diagnóstico patológico ha sido progresivamente creciente y se ha consolidado como tecnología esencial en la práctica asistencial. En general, y muy especialmente en patología oncológica, son cada vez más las patologías cuyo diagnóstico y clasificación requieren IHQ. La obtención de nuevos métodos de recuperación antigénica y la afluencia constante de nuevos anticuerpos han ampliado notablemente el ámbito de aplicación con nuevas utilidades en diagnóstico, pronóstico y predicción de respuesta a tratamientos oncológicos específicos.
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La inmunohistoquímica (IHC) es una técnica utilizada en el campo de la anatomía patológica y la investigación biomédica para visualizar la presencia, distribución y localización de proteínas específicas en muestras de tejido utilizando anticuerpos específicos y técnicas de tinción. La técnica de IHC es fundamental en la identificación de proteínas específicas en el tejido y es ampliamente utilizada en el diagnóstico de enfermedades, la caracterización de tumores, la investigación biomédica y la identificación de biomarcadores. Un portfolio diseñado para aumentar la fiabilidad de los diagnósticos, mejorando la salud global.
La dermatopatología incluye una larga lista de entidades, algunas con una histopatología muy similar. La immunohistoquímica representa una importante herramienta de ayuda en el diagnóstico, diagnóstico diferencial y pronóstico de muchas de las neoplasias cutáneas. La inmunohistoquímica es también la mejor técnica para determinar el origen de un tejido o la diferenciación de las células neoplásicas. En muchos casos la inmunohistoquímica permite un diagnóstico más preciso de los distintos procesos infiltrando la piel. Este artículo revisa el papel de la inmunohistoquímica en el estudio de la diferenciación y el comportamiento biológico de la mayoría de las neoplasias que pueden afectar a la piel. Se revisan las técnicas de inmunoperoxidasa, se discute la utilidad de los anticuerpos utilizados con mayor frecuencia y se presentan una serie de problemas diagnósticos en los que la immunohistoquímica puede resultar muy útil. En cada caso, la finalidad es llegar a un diagnóstico concreto y definitivo. En la primera parte de esta revisión se estudian los anticuerpos que exploran las distintas líneas de diferenciación de las neoplasias cutáneas.
Marcadores de estirpe epitelial y citoqueratinas
Las citoqueratinas (CK) constituyen el mayor grupo de filamentos intermedios y son proteínas filamentosas que, junto con otros filamentos, forman el citoesqueleto de las células eucariotas. Algunas de sus funciones son, por tanto, el mantenimiento de la estructura de la célula epitelial, la protección ante traumatismos y la comunicación entre los componentes citoplasmáticos. Se expresan en pares y tienen patrones de expresión de acuerdo con su localización. Se clasifican numéricamente del 1 al 20, según su peso molecular (PM) y su punto isoeléctrico. Se distinguen 2 grandes grupos de CK: a) CK de epitelios simples (CK7, CK8, CK18, CK19, CK20); y b) CK de epitelios más complejos, como el de la piel (CK5/6, CK10, CK14, CK15).
La pan-CK AE1/AE3 es un cóctel de CK que incluye un amplio espectro de PM. Esta CK es muy útil en la identificación de neoplasias de estirpe epitelial, en su clasificación respecto al grado de diferenciación y en la detección de sus micrometástasis. En la piel esta pan-CK marca la epidermis, las glándulas ecrinas y la unidad folículo-sebáceo-apocrina. La pan-CK AE1/AE3 es capaz de identificar la mayor parte de carcinomas (fig. 1), incluso aquellos pobremente diferenciados, por lo que es una CK de alta sensibilidad diagnóstica. Reconoce también algunas neoplasias mesenquimales constituidas por células epitelioides, como el mesotelioma, el sarcoma sinovial o el sarcoma epitelioide, debido a que se trata de neoplasias constituidas por células con una gran cantidad de filamentos intermedios en su citoplasma. La CK AE1 reconoce CK ácidas (CK 10-15-16-19). Es una CK característica de epitelios simples y en la piel solo se expresa en la capa basal de la epidermis. La CK AE3 reconoce CK básicas (CK1-CK8) y es característica de epitelios transicionales y de carcinomas escamosos. Esta citoqueratina se expresa en todo el espesor de la epidermis.
La CK CAM-5.2 reconoce CK de bajo PM en neoplasias glandulares. Existe controversia en la literatura respecto al tipo de CK reconocidas por la CAM-5.2, ya que en la literatura más antigua se consideraba como marcador de CK 8, 18, 19, pero hoy se sabe que esta CK identifica la CK8 y más débilmente, pero de manera específica, la CK7, pero no la CK18. En la piel normal la CK CAM-5.2 marca las unidades ecrinas y apocrinas, pero no los estratos de epidermis normal. En caso de neoplasias muy indiferenciadas permite establecer su estirpe epitelial, por lo que resulta útil en el diagnóstico diferencial histopatológico entre carcinomas pobremente diferenciados, linfomas, melanomas y sarcomas. Resulta también útil en el reconocimiento de tumores con diferenciación neuroendocrina metastásicos en la piel, como el tumor carcinoide o el carcinoma microcítico de pulmón y en tumores neuroendocrinos primarios cutáneos y sus metástasis, como el tumor de Merkel. Por último, es capaz de diferenciar epitelio glandular de bajo PM en el seno del epitelio epidérmico en las enfermedades de Paget mamaria y extramamaria (fig. 2). Resulta también de gran ayuda en el diagnóstico diferencial histopatológico entre la enfermedad de Paget pigmentada de la mama y el melanoma maligno con células de aspecto pagetoide. La CK 35BH11 reconoce CK de bajo PM (CK8 y CK18). La CK8 es una CK básica y, junto con la CK18, que es una CK ácida, constituyen probablemente las CK expresadas con más frecuencia dentro de la familia de filamentos intermedios. Se expresan en todos los epitelios simples, incluyendo el epitelio glandular de tiroides, mama, tracto gastrointestinal, tracto respiratorio y tracto urogenital.
La CK 34βE12/CK 903 es el marcador más utilizado para identificar CK de alto PM. Reconoce las CK 1, 10 y 14, que se expresan en el epitelio ductal, epitelio escamoso, en células basales y en células mioepiteliales. Esta CK se expresa en adenocarcinomas de mama, páncreas, vías biliares y glándulas salivales, así como en carcinomas de células escamosas y de células transicionales. En dermatopatología esta CK es también muy útil para demostrar la naturaleza epitelial de la sustancia amiloide en las papilas dérmicas en casos de amiloidosis maculosa y liquen amiloideo. En neoplasias cutáneas esta CK es positiva en el carcinoma espinocelular y en tumores anexiales. Recientemente se ha postulado su utilidad en el diagnóstico diferencial entre carcinoma espinocelular atípico y fibroxantoma atípico (FXA).
La CK MNF116 es otra pan-CK que reconoce las CK 5, 6, 8, 17 y 19. Presenta un patrón amplio de reactividad desde el epitelio glandular simple al epitelio escamoso estratificado. En la piel normal se expresa de forma particularmente intensa en las células basales de la epidermis y en los anexos cutáneos. Resulta positiva en neoplasias epiteliales, tanto benignas como malignas, y negativa en todas las neoplasias mesenquimales y melanocíticas. Es también muy útil en la identificación de algunas variantes histopatológicas poco frecuentes de carcinoma espinocelular indiferenciado, como el carcinoma espinocelular de células fusiformes o el carcinoma espinocelular sarcomatoide.
La CK7 está presente en gran variedad de epitelios simples. Los carcinomas espinocelulares cutáneos son habitualmente negativos para esta CK, mientras que los originados en otros epitelios escamosos no queratinizantes, como el cuello uterino, resultan positivos. Es un marcador muy sensible y bastante específico en la identificación de las células neoplásicas de la enfermedad de Paget mamaria y extramamaria. La CK20 muestra un rango de expresión más restringido que la CK7. Es positiva en carcinoma de células transicionales, en el tumor de Merkel, así como en adenocarcinomas biliares, de páncreas, de colon y de recto, por lo que resulta muy útil en el estudio inmunohistoquímico de neoplasias cutáneas tanto primarias como metastásicas. Junto con la CK7 se incluye en los paneles de anticuerpos utilizados para tratar de identificar el tumor primario en las metástasis cutáneas de origen desconocido. La CK5/6 reconoce CK de alto PM y es un marcador útil de diferenciación escamosa que resulta positivo en la epidermis y en el epitelio de los anexos, así como en múltiples neoplasias anexiales cutáneas, tanto benignas como malignas. La CK14 es positiva en tumores del epitelio epidérmico, como el carcinoma espinocelular y el carcinoma basocelular, así como en neoplasias de epitelio anexial; sin embargo, resulta negativa en los adenocarcinomas anexiales. La CK8 resulta negativa en el carcinoma espinocelular y en el carcinoma basocelular, pero es positiva en algunas neoplasias con diferenciación ecrina y apocrina, como el siringoma o el hidradenoma apocrino.
El p63 (KET, p73L) es una proteína de la familia p53 con capacidad de actuar como factor de transcripción regulando la progresión del ciclo celular, manteniendo la capacidad proliferativa o induciendo apoptosis. Se encuentra principalmente en la capa basal del epitelio escamoso estratificado y del epitelio de transición. En la piel se expresa intensamente en el núcleo de las células basales y suprabasales de la epidermis, así como en las células mioepiteliales que rodean los ovillos secretores de las glándulas ecrinas y apocrinas. Este marcador está ausente en los fibroblastos dérmicos, las fibras de músculo liso, las células de Schwann y las células endoteliales. También se expresa en las células basales del epitelio del cuello uterino, la vagina, el urotelio, la mucosa bronquial, las glándulas prostáticas y las células mioepiteliales de las glándulas seromucosas.
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